- 實(shí)驗(yàn)微生物接種技術(shù)講解 推薦度：
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關(guān)于實(shí)驗(yàn)微生物接種技術(shù)
一、目的：
學(xué)習(xí)微生物工作的基本接種方法，建立純培養(yǎng)技術(shù)中的“無(wú)菌”概念，掌握無(wú)菌操作技術(shù)。
二、原理：
所謂接種就是將一定量的純種微生物在無(wú)菌操作條件下轉(zhuǎn)移到另一已滅菌，并適宜于該菌生長(zhǎng)繁殖所需的培養(yǎng)基上的過(guò)程。本實(shí)驗(yàn)要求嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，一般是在無(wú)菌操作臺(tái)或在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)火焰旁進(jìn)行。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)方式，可以采用不同的接種工具和接種方法。
三、實(shí)驗(yàn)材料：
斜面培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、平板培養(yǎng)基、記號(hào)筆、酒精燈、接種針、消毒酒精、涂布棒等。
四、操作步驟
�。ㄒ唬o(wú)菌操作
菌種分離或移接工作應(yīng)在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行，接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)是常用的接種環(huán)境。用前先清潔好衛(wèi)生，再進(jìn)行消毒處理。可用紫外線燈和甲醛熏蒸的雙重作用，或用3%來(lái)蘇爾及其他表面消毒進(jìn)行噴霧。
操作者的手應(yīng)先用肥皂洗凈，再用酒精棉球消毒；整個(gè)操作過(guò)程都要靠近酒精燈火焰；接種工具在用前和用后必須在燈焰上滅菌；棉塞不得亂放，操作中只能夾在手上；不能有跑、跳等力度大的動(dòng)作，以免引起空氣大振動(dòng)而增加染菌機(jī)會(huì)。
�。ǘ┙臃N方法
�。�1）斜面接種：
從已長(zhǎng)好微生物的菌種管移接到另一斜面管的方法。此法用于好氣性微生物的接種。
左手持菌種管和斜面管，使斜面向上，并盡量放平。用右手先將棉塞擰轉(zhuǎn)松動(dòng)，再拿接種環(huán)，用右手的小指、無(wú)名指和手掌撥下棉塞并夾緊，同時(shí)將管口在火焰上燃燒一圈，接種環(huán)灼燒滅菌后插入管內(nèi)，冷卻、挑菌，立即轉(zhuǎn)入斜面管底部，沿斜面劃曲線或直線。
�。�2）液體接種：
由斜面菌接種到液體培養(yǎng)基（如試管或三角瓶等）中的方法。
操作與上法基本一致，只是在將接種環(huán)送入液體培養(yǎng)基中時(shí)使環(huán)在液體與管壁接觸的地方輕輕磨擦，使菌體分散，然后塞上棉塞，再輕輕搖動(dòng)均勻，即可培養(yǎng)。如果菌種是培養(yǎng)在液體培養(yǎng)基中時(shí)，一般用移液管或滴管接種。
�。�3）穿刺接種：
用接種針挑取菌種后，插入深層固體培養(yǎng)基內(nèi)，（不要刺到底部），再沿原路拔出，此法用于厭氣性細(xì)菌接種、檢查細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)能力。
（4）平板接種：
將菌種接至培養(yǎng)皿的方法，平板接種的目的是觀察菌落形態(tài)、分離純化菌種，活菌計(jì)數(shù)以及在平板上進(jìn)行各種試驗(yàn)時(shí)采用的一種接種方法，可分為下面幾種：
1)斜面接平板
a.劃線法：見平板劃線分離法。
b.點(diǎn)種法：一般用于觀察霉菌和酵母細(xì)胞，輕輕點(diǎn)在平板的表面（根霉點(diǎn)一點(diǎn)，曲霉、酵母可點(diǎn)3-4點(diǎn)）即可。
2)平板接斜面：一般是將經(jīng)平板分散培養(yǎng)得到的單菌落接種到斜面，以便作鑒定或擴(kuò)大培養(yǎng)、保存之用。
五、思考題
1．何謂無(wú)菌操作？接種前應(yīng)作哪些準(zhǔn)備工作？
2．總結(jié)幾種接種方法的要點(diǎn)及應(yīng)注意的事項(xiàng)？
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