微生物介紹

　　一．概念

　　1.衛(wèi)生微生物學：是研究微生物與其環(huán)境相互作用的規(guī)律、對人類健康的影響以及應對方略的科學。

　　2.生境：是指微生物能在其中生存并執(zhí)行特定功能的微小環(huán)境，又稱之為微環(huán)境或微小生境。

　　3.龕：含義比生境更為廣泛，不但包含了生物生存的空間概念，還蘊含著功能作用以及在不同溫度濕度等環(huán)境變化中的位置，也稱為生態(tài)位。

　　4.適應性：生物能適應在一定時間內的環(huán)境波動或巨變以保證其本身生活和生存的能力。

　　5.變異性：指同種生物世代之間或同代生物不同個體之間在形態(tài)特征、生理特征等方面所表現(xiàn)的差異。

　　6.演替：在特定的生態(tài)系統(tǒng)中，不同生物群落相互更替的過程稱演替。

　　7.菌群失調;指在原生態(tài)環(huán)境內正常微生物群發(fā)生種類、總菌數(shù)和各種群落成員的活菌數(shù)的異常變化。

　　8.生物修復：是微生物催化降解有機污染物、轉化其他污染物，從而消除污染的一個受控或自發(fā)進行的過程。

　　9.指示微生物：是在常規(guī)衛(wèi)生監(jiān)測中，用以指示樣品衛(wèi)生狀況及安全性的（非致�。┪⑸�物（或細菌）。

　　10.菌落總數(shù)：是指被檢樣品的單位重量（g）、容積、表面積或體積內所含有的能在某種培養(yǎng)基上經(jīng)一定條件、一定時間培養(yǎng)后長出的菌落數(shù)量。

　　11.消毒：是指殺滅或清除傳播媒介上病原微生物，使其達到無害化的處理。

　　12.滅菌保證水平（SAL）：單位產(chǎn)品上滅菌處理后存活微生物的概率，通常表示為10。

　　13.滅菌：是指殺滅或清除傳播媒介上一切微生物的處理。

　　14.無菌：指不存在任何微生物的狀況。

　　15.無菌操作：指在無菌狀態(tài)下的操作。

　　16.消毒劑抗性：是指與其他細菌相比，某種細菌能在更高消毒劑濃度下存活或生長，說明其具有更高的消毒劑抗性。

　　17.固有抗性：指微生物對某些消毒劑天生不敏感，一般有微生物本身的特殊結構或性能所致

　　18.獲得性抗性：本來敏感的微生物在長期與消毒劑相互作用的過程中，通過某種途徑獲得（可自發(fā)獲得或從外界獲得）了對該消毒劑的抗性基因。

　　19.生物安全：狹義上指實驗室生物安全。廣義的生物安全是指避免由于對具有感染力的有機體或遺傳改良有機體的研究或商品化生產(chǎn)而對人類的健康和安全以及對環(huán)境的保護帶來的風險，尤其是外來物種的入侵及轉基因物種的產(chǎn)生、轉移及應用等。

　　20.生物因子：是指實驗室中操作的一切微生物和生物活性物質。

　　21.生物安全柜（BSC）：是處理具有感染性的實驗材料時，用來保護操作者本人、實驗室環(huán)境以及實驗材料，使其避免操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物的箱型空氣凈化負壓裝置。

　　22.生物危害:是指由生物因子對環(huán)境及生物體的健康所造成的危害。

　　23.生物戰(zhàn)劑：是指能在人員或者動植物機體內繁殖或引起大規(guī)模疾病的微生物制劑。

　　24.微生物氣溶膠：以固體或液體微小顆粒分散于空氣中的分散體系。

　　25.腐�。褐甘称返牡鞍踪|成分在厭氧條件下被微生物分解，產(chǎn)生以惡臭為主的變化。

　　26.酸敗：指食品中的脂肪成分被微生物分解成脂肪酸和甘油的變化。-n

　　27.發(fā)酵：指食品中的碳水化合物成分被微生物分解成酸、醇、和氣體的變化。

　　28.食源性疾�。菏侵竿ㄟ^攝食進入人體的各種致病因子所引起的，通常具有感染性質或中毒性質的一類疾病。

　　29.食物中毒：是指攝入了含有生物性、化學性有毒有害物質的食品或者把有毒物質當做食品攝入后出現(xiàn)的非傳染性的急性、亞急性疾病。

　　30.細菌性食物中毒:是指由于食入被病原菌或其毒素污染的食物后所引起的以急性胃腸炎為主要中毒癥狀的疾病。

　　31.HACCP(危害分析關鍵控制點)：生產(chǎn)（加工）安全食品的一種控制手段；對原料、關鍵生產(chǎn)工序、及影響產(chǎn)品安全的人為因素進行分析，確定加工過程的關鍵環(huán)節(jié)，建立完善的監(jiān)控程序和監(jiān)控標準，采取規(guī)范的糾正措施。

　　32.醫(yī)院感染：是指住院患者在醫(yī)院內獲得的感染，包括在住院期間發(fā)生的感染和在醫(yī)院內獲得出院后發(fā)生的感染，但不包括入院前已開始和入院前已存在的感染，醫(yī)院工作人員在醫(yī)院內獲得的感染也屬醫(yī)院感染。

　　二．簡答

　　1.衛(wèi)生微生物學定義的范疇

　　狹義上，不包括引起傳染病流行的病原微生物。

　　廣義上，包括存在于自然界的所有微生物（致病，非致病，有害，有益）.

　　2.衛(wèi)生微生物學的應用

　�。�1）感染性疾病的控制和治療。

　�。�2）感染性疾病的預防。

　　（3）生物病原性突發(fā)事件中的應用。

　�。�4）在制定國家標準和行業(yè)規(guī)范服務中的應用。

　�。�5）應對生物危害和恐怖。

　�。�6）在生產(chǎn)，生活和各種產(chǎn)業(yè)開發(fā)中的應用。

　　（7）在科學發(fā)展和科學研究中的應用。

　　3.從哪些角度進行衛(wèi)生微生物相關案例的分析？

　　4.微生物與環(huán)境相互作用的規(guī)律

　�。�1）限制因子定律：任何生物的總產(chǎn)量或生物量決定于所存在環(huán)境中該生物生長所

　　需要的數(shù)量最少或濃度最低營養(yǎng)因子（指其含量與微生物需要量之比所占的百

　　分比最低）。

　�。�2）耐受性定律：指在一個生態(tài)環(huán)境中，微生物的生長繁殖和消長不但取決于營養(yǎng)，

　　而且受各種物理化學等其他因素的影響。

　�。�3）綜合作用定律：一個生物或一群生物的生存和繁殖取決于綜合環(huán)境。

　　5.微生物種群之間相互作用的類型

　　互生：偏利互生，互利互生，互惠互生

　　競爭拮抗捕食寄生共生

　　6.菌群失調的誘發(fā)因素

　　（1）.射線照射

　�。�2）使用抗生素

　　（3）外科手術

　�。�4）其他：醫(yī)源性因素，使用免疫制劑、細胞毒性物質和激素，使得機體免疫力下降。

　　7.微生物在自然界物質循環(huán)中的作用

　　將無機物合成為有機物（光合菌，化能自養(yǎng)菌）——生產(chǎn)者

　　可以分解有機物——分解者

　　又可將其還原為無機物——消耗者

　　總之，它是自然界生態(tài)系統(tǒng)能量物質流循環(huán)中不可分割的一部分。

　　8.微生物耐受性對其生存和分布的影響

　　微生物的耐受性決定了其生存的可能性和分布的廣泛性，對許多生態(tài)因子均耐受或者對某種生態(tài)因子耐受性較寬的微生物常常分布甚廣，這是自然選擇的結果，也是微生物群落發(fā)生演替的原因。

　　9.微生物生態(tài)學的應用

　�。�1）在病因研究中的作用

　　（2）在認識疾病本質中的作用

　�。�3）在防治疾病中的作用

　�。�4）在環(huán)境污染預防與控制中的作用

　　對有機物的降解對金屬的轉化對污染物的降解與轉化污染環(huán)境的生物修復微生物檢測

　　10.衛(wèi)生微生物檢測的特點

　　檢測對象多，檢測范圍廣，標本的來源多，檢測的方法更敏感，檢測環(huán)境標本中數(shù)量很低的致病衛(wèi)生物以及往往需要定量和分型檢測等。

　　11.如何提高樣品中目的微生物的檢出率

　　（1）增加加樣量

　�。�2）濃縮待測微生物

　�。�3）對目的微生物進行選擇性増菌

　　12.對于某些含有不溶于水的成分或者抑菌成分的樣品如何處理

　�。�1）檢品為固體、非水溶性軟膏等，均質化后再進行稀釋

　　（2）非水溶性軟膏，也可加入乳化劑使其分散

　�。�3）含有抑菌成分（防腐劑，抗生素，消毒劑）的，采取中和法，濾膜過濾法、稀釋法和離心法等。

　　另外，還應考慮采取適當?shù)牟襟E，使受損傷的菌株得以復蘇。

　　13.衛(wèi)生微生物檢測的基本原則

　　（1）樣品的采集原則

　　代表性和針對性避免新污染避免采樣時對微生物的殺菌作用和引入新的抑菌物質保護目的微生物詳細標記樣品

　　（2）樣品的運輸原則

　　盡快送檢保護待檢微生物根據(jù)生物安全規(guī)定妥善包裝待運輸?shù)臉吮?/p>

　　完善的樣品交接

　　（3）實驗室檢驗原則

　　相應的實驗室硬件設施合格的人員和標準或公認的方法加強實驗室質量控制根據(jù)衛(wèi)生檢驗的特點采取特定措施

　　14.樣品濃縮的方式

　　（1）沉淀法（離心沉淀）

　�。�2）過濾法（濾膜過濾）

　　（3）吸附沉淀法(特異性、非特異性）

　�。�4）免疫磁珠法(親和作用,基于抗原抗體反應)

　　15.損傷菌的復蘇

　　修復的基本方法是：在細菌繁殖之前，將其置于無選擇壓力的環(huán)境中，改變培養(yǎng)溫度和時間。

　　例如，（1）分離加工食品中的沙門菌時，先將樣品置于BP培養(yǎng)基中進行前增殖。

　　（2）副溶血弧菌在海產(chǎn)品加工保存中受損，用無選擇性低鹽增菌。

　　（3）金葡菌檢測中用的肉湯中含有高鹽，亞碲酸鉀，抑制損傷菌，可加觸酶或者過氧化酶凈化劑，以中和抑菌物質。

　　16.增菌和分離

　　（1）物理方法;調節(jié)培養(yǎng)的溫度，氣體和光照。

　　（2）化學方法：在分離培養(yǎng)基中加入抑制其他微生物生長和促進目的微生物生長的化學制劑，配成選擇性鑒別培養(yǎng)基，達到鑒別分離的目的。

　　例如：1mg/ml青霉素抑制革蘭陽，促進革蘭陰

　　多粘菌素B抑制革蘭陰

　　制霉菌素、放線酮抑制真菌

　　17.定量計數(shù)的方法

　�。�1）傾注平板計數(shù)法

　�。�2）表面涂布計數(shù)法

　　（3）MPN法

　�。�4）其他

　　18.分型鑒定的方法

　�。�1）血清學分型（玻片凝集實驗抗血清和待檢細菌懸液混合，若相應，可見凝集塊）

　�。�2）.噬菌體分型（噬菌斑）

　�。�3）細菌素分型（抑菌斑:對某細菌素敏感的細菌，具有該細菌素的受體，兩者結合后，敏感菌被殺死）

　�。�4）.耐藥譜分型

　�。�5）質粒圖譜分型（質粒提取--限制性內切酶酶切--瓊脂糖凝膠電泳--結果觀察）

　�。�6）毒素分型（金葡菌——腸毒素肉毒梭菌——肉毒素）

　�。�7）脈沖場凝膠電泳分子分型（電泳譜圖0

　　（8）其他分子生物學方法

　　19.金葡菌食物中毒的實驗室診斷標準

　�。�1）從中毒食品中檢出腸毒素

　　（2）從中毒食品或患者吐瀉物中經(jīng)培養(yǎng)檢出金葡菌，菌株經(jīng)腸毒素檢測證實在不同樣品中檢出同一型別腸毒素

　　（3）從不同患者吐瀉物中檢出金葡菌，其腸毒素為同一型別。

　　20.衛(wèi)生指示物的類型和衛(wèi)生意義

　　（1）菌落總數(shù)：包括細菌菌落總數(shù)，霉菌菌落總數(shù)，酵母菌菌落總數(shù)。用以評價被檢出樣品的一般衛(wèi)生質量，污染程度和安全性。

　�。�2）大腸菌群，糞大腸菌群，大腸埃希菌，糞鏈球菌，產(chǎn)氣莢膜梭菌等。用以評價檢品受人畜糞便的污染狀況，間接反應腸道病原微生物存在的可能性，對樣品的衛(wèi)生安全性進行評價。

　�。�3）其他指示菌：包括某些特定環(huán)境下不能檢出的菌類（特定菌，致病菌，指示性微生物）

　�。�4）病毒（包括噬菌體）：間接反映腸道病毒存在的可能性。

　　21.指示微生物選擇的原則

　　數(shù)量大，易于檢出；檢驗方法簡單、經(jīng)濟、方便；有一定的代表性，其數(shù)量化能反映樣品的衛(wèi)生狀況和安全性。

　　22.理想的糞便污染的指示菌應具備的條件

　�。�1）是人及溫血動物腸道正常菌群的組成部分，而且數(shù)量大

　�。�2）排除體外后，在外界環(huán)境中存活時間與腸道致病菌大致相似或稍長

　�。�3）排除體外后，在外界環(huán)境中不繁殖

　�。�4）在被人或動物的糞便污染的樣品中易檢出，而未被糞便污染的樣品中無此種菌存在

　�。�5）用作飲用水的指示菌，對常用飲用水消毒劑的抵抗力應不低于或略強于腸道致病菌

　　（6）檢驗方法簡單，易于定量計數(shù)

　　23.不直接檢測致病微生物，而通過檢測指示微生物反應樣品衛(wèi)生安全性的原因

　�。�1）致病微生物種類繁多，檢測方法多樣，不可能分別檢測各種微生物

　�。�2）分離、鑒定致病微生物需時長，不滿足實際工作需要

　　（3）分離鑒定致病微生物費用高，對技術人員要求也高

　　（4）致病微生物數(shù)量少，而可能由于檢測方法靈敏度不高，或者受檢測量的限制而導致假陰性結果

　　24.我國規(guī)定的不得檢出的致病菌

　�。�1）沙門菌和志賀菌：腸道致病菌糞口傳播

　�。�2）金葡菌（皮膚鼻咽腸道）

　　（3）銅綠假單胞菌(皮膚，上呼吸道腸道）

　　（4）破傷風梭菌（破傷風痙攣毒素）

　　25.理想的病毒指示物的條件

　�。�1）檢驗方法簡單

　　（2）操作安全

　�。�3）抵抗力與腸道病毒相當或稍強

　　（4）在被人糞腸道病毒污染的環(huán)境中一定存在，其存在數(shù)量應≥腸道病毒的數(shù)目

　　26.腸道病毒的指示微生物

　　大腸埃希菌噬菌體f2脊髓灰質炎病毒減毒疫苗株Ⅰ

　　27.滅菌的物質應：無菌，無毒，無熱原質，無變應原。

　　28.消毒與滅菌的區(qū)別與聯(lián)系：消毒是指殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物，使之減少到不引發(fā)疾病即可，其要求的程度因微生物的種類與防病的需要而異；滅菌需要殺滅或清除全部的微生物，其概念是絕對性的，不隨條件的變化而變化。消毒處理不一定能達到滅菌的處理，但滅菌處理一定可達到消毒的目的。

　　29.常用的物理化學消毒滅菌法

　　（1）物理：熱力、紫外線、電離輻射、濾過除菌、微波消毒、脈沖強光

　�。�2）化學：含氯消毒劑、過氧化物類消毒劑、碘消毒劑、醇類消毒劑、醛類消毒劑、季銨鹽類消毒劑、胍類，酚類，氣體消毒劑，其他

　�。�3）生物：利用活體生物或生物材料

　　30.消毒滅菌效果的影響因素

　�。�1）處理的劑量（強度，時間）（2）微生物的種類和數(shù)量

　�。�3）溫度（4）濕度（5）酸堿度（6）化學拮抗物質（7）穿透力