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細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(精選5篇)
在學(xué)習(xí)、工作生活中,報(bào)告有著舉足輕重的地位,報(bào)告包含標(biāo)題、正文、結(jié)尾等。其實(shí)寫報(bào)告并沒有想象中那么難,下面是小編幫大家整理的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告,希望對(duì)大家有所幫助。
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 1
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
、睂W(xué)習(xí)并掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的無菌操作技術(shù)。
、擦私庠(xì)胞培養(yǎng)的基本方法及操作過程。
⒊學(xué)習(xí)細(xì)胞計(jì)數(shù)及營(yíng)養(yǎng)液的配制。
實(shí)驗(yàn)原理
、奔(xì)胞原代培養(yǎng)
原代細(xì)胞培養(yǎng)是指直接從動(dòng)物體內(nèi)獲取的細(xì)胞、組織和器官,經(jīng)體外培養(yǎng)后,直到第一次傳代為止。這種培養(yǎng),首先用無菌操作的方法,從動(dòng)物體內(nèi)取出所需的組織(或器官),經(jīng)消化,分解成單個(gè)游離細(xì)胞,在人工培養(yǎng)下,使其不斷的生長(zhǎng)及繁殖。
細(xì)胞培養(yǎng)是一種操作繁瑣而又要求十分嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)技術(shù)。要使細(xì)胞能在體外長(zhǎng)期生長(zhǎng),必須滿足兩個(gè)基本要求:一是供給細(xì)胞存活所必須的條件,如適量的水、無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關(guān)的生長(zhǎng)因子、氧氣、適宜的溫度,注意外環(huán)境酸堿度與滲透壓的調(diào)節(jié)。二是嚴(yán)格控制無菌條件。
、布(xì)胞死活鑒定死活細(xì)胞的鑒定方法有很多種,常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細(xì)胞死活鑒定方法,簡(jiǎn)便,易于操作。不同的死活細(xì)胞鑒定方法有各自不同具體的反應(yīng)機(jī)理,但無論采用何種辦法,都是利用了死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異。
染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法,根據(jù)染色機(jī)理的不同,染料或使死細(xì)胞著色,或使活細(xì)胞著色。
死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異主要包括:
☆死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異:活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜,對(duì)細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用,只允許物質(zhì)選擇性的.通過;而細(xì)胞死亡之后,細(xì)胞膜受損,通透性增加。常用的以臺(tái)盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。臺(tái)盼藍(lán),又稱錐藍(lán),是一種陰離子型染料,不能通過完整的細(xì)胞膜。所以經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色后只能使死細(xì)胞著色,而活細(xì)胞不被著色。甲基藍(lán)有類似的染色機(jī)理。植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離也可鑒定死活。
☆死活細(xì)胞在代謝上的差異:是采用美藍(lán)染料鑒定酵母細(xì)胞死活的依據(jù)。美藍(lán)是一種無毒染料,氧化型為藍(lán)色,還原型為無色。由于活細(xì)胞中新陳代謝的作用,使細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力,能使美藍(lán)從藍(lán)色的氧化性變?yōu)闊o色的還原型,因此美藍(lán)染色后活的酵母細(xì)胞無色;而死細(xì)胞或代謝緩慢的老細(xì)胞,則因它們的無還原能力或還原能力極弱,使美藍(lán)處于氧化態(tài),從而被染成藍(lán)色或淡藍(lán)色。
除此之外,還有一些細(xì)胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料,可以使活細(xì)胞液泡著紅色,而細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被著色;死細(xì)胞的液泡不被著色或淺染,染料彌散于整個(gè)細(xì)胞中,細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)被染成紅色。有時(shí)侯為了增加染色效果可以將兩種染料結(jié)合使用,如甲基藍(lán)-中性紅混合染色法。
實(shí)驗(yàn)用品
、辈牧闲“资
、苍噭
臺(tái)盼藍(lán)、伊紅、PBS緩沖液、細(xì)胞培養(yǎng)液(含生長(zhǎng)因子)
、称鞑
剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無菌操作臺(tái)、正置光學(xué)顯微鏡、倒置光學(xué)顯微鏡、解剖盤、滴管、離心管、離心機(jī)、注射器、Eppendorf管、培養(yǎng)皿、酒精燈、塑料培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板
實(shí)驗(yàn)步驟
、比〔
取小鼠一只,采用斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min,取出轉(zhuǎn)入超凈工作臺(tái)內(nèi)的解剖盤中,無菌操作打開腹腔,取出其脾臟,除去其周圍的脂肪組織,并用PBS液自上而下淋洗1-2次,轉(zhuǎn)入無菌培養(yǎng)皿中待用。
⒉分離脾細(xì)胞
用滴管向培養(yǎng)皿中注入30滴PBS緩沖液,再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟,注射時(shí)沿長(zhǎng)軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼,并用“L”型針頭輕輕刮出脾細(xì)胞。在均勻吹勻脾臟細(xì)胞。
吸取上述分離的單個(gè)脾細(xì)胞懸液,放入Eppendorf管中,使量至1mL,以1000r/min離心5min。⒊培養(yǎng)脾細(xì)胞
取塑料培養(yǎng)皿一套,用移液槍吸取培養(yǎng)液2mL加入塑料皿中,并將皿標(biāo)記待用。取離心后的Eppendorf管,棄去上清液,用移液槍(200ul)吸取塑料皿中的培養(yǎng)液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中,用槍頭吹勻管底的脾細(xì)胞,吸取200ul脾細(xì)胞懸液接種于上述塑料皿中,混勻后放入37°C,5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
、磁渲迫疽
用生理鹽水配成5%臺(tái)盼藍(lán)染液,備用。⒌染色
取0.5mL細(xì)胞懸濁液放入試管中,加入1-2滴染液;旌稀2-5min后將細(xì)胞放在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上觀察死活情況,注意不要有
氣泡產(chǎn)生,放大倍數(shù)為10x10。染色后活細(xì)胞不著色,死細(xì)胞顯示藍(lán)色。注意染色時(shí)間不能超過15min,否則染液將細(xì)胞毒殺。
⒍計(jì)數(shù)
在10x10倍的顯微鏡下觀察,計(jì)算血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的4個(gè)4小方格的細(xì)胞數(shù)量。包括細(xì)胞總數(shù)與死細(xì)胞數(shù)量。壓線者計(jì)上不計(jì)下,計(jì)左不計(jì)右。
、酚(jì)算細(xì)胞活力
根據(jù)公式:細(xì)胞活力=(總細(xì)胞數(shù)-死細(xì)胞數(shù))/總細(xì)胞數(shù)×100%
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
臺(tái)盼藍(lán)染色后的細(xì)胞(10x10)伊紅染色后的細(xì)胞(10x10)
總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞數(shù)統(tǒng)計(jì)表(10×10)
項(xiàng)目自己培養(yǎng)細(xì)胞老師培養(yǎng)細(xì)胞總細(xì)胞數(shù)個(gè)/ml活細(xì)胞數(shù)個(gè)/ml細(xì)胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%分析與討論
⒈結(jié)果分析
本次實(shí)驗(yàn)中我們小組自己培養(yǎng)細(xì)胞所測(cè)細(xì)胞活力為21.4%,并不算高,分析得應(yīng)有以下原因可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果(包括誤差):
⑴若在無菌操作的過程中操作不規(guī)范,導(dǎo)致染菌,會(huì)極大的影響觀察,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。
、迫粼陔x心分離呈單細(xì)胞的過程中離心機(jī)轉(zhuǎn)速過快或時(shí)間過長(zhǎng)很可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞破裂,導(dǎo)致小鼠脾細(xì)胞大量死亡。
⑶染色時(shí)間過長(zhǎng),或觀察時(shí)間過長(zhǎng)都會(huì)導(dǎo)致染色試劑將細(xì)胞殺死,使細(xì)胞活力驟降,這是導(dǎo)致細(xì)胞活力比較低的重要原因。
⑷實(shí)驗(yàn)中的一些操作不正確或不規(guī)范的情況、計(jì)算帶來的誤差等也會(huì)直接導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)誤差。
⒉注意事項(xiàng)
、艊(yán)格進(jìn)行動(dòng)物消毒,需用75%酒精消毒。
⑵嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,防止細(xì)菌、霉菌、支原體污染,避免化學(xué)物質(zhì)污染。
⑶吸取液體前,瓶口和吸管硬行火焰消毒;吸取液體時(shí),避免碰撞。
、入x心管入臺(tái)前,管口、管壁應(yīng)消毒。
、蓪(shí)驗(yàn)者離開超凈臺(tái)時(shí),要隨時(shí)用肘部關(guān)閉工作窗。
⑹器材使用時(shí)既要注意用火焰消毒,又要防止?fàn)C傷、燙死細(xì)胞。
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 2
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、通過對(duì)原核和真核各種形態(tài)細(xì)胞的光學(xué)顯微鏡觀察,了解細(xì)胞的形態(tài)及其顯微結(jié)構(gòu);
2、學(xué)習(xí)顯微測(cè)量的方法,對(duì)細(xì)胞的大小有一直觀認(rèn)識(shí)。
二、實(shí)驗(yàn)材料和儀器:
小白鼠肝細(xì)胞切片;雞血紅細(xì)胞;蠶豆葉片橫切片;
普通光學(xué)顯微鏡;目鏡測(cè)微尺;鏡臺(tái)測(cè)微尺;載玻片;蓋玻片。
三、實(shí)驗(yàn)步驟:
(一)細(xì)胞形態(tài)觀察
l、動(dòng)物細(xì)胞的觀察
。1)人肝細(xì)胞切片:在顯微鏡下仔細(xì)觀察肝細(xì)胞的形態(tài)構(gòu)造。
(2)雞血細(xì)胞涂片的觀察:觀察血細(xì)胞的組成;紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的形態(tài)特點(diǎn)。
2、植物細(xì)胞的觀察
取蠶豆葉片橫切片的觀察:注意表皮細(xì)胞和葉肉細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。
。ǘ┘(xì)胞的'大小和測(cè)量
1、卸下目鏡的上透鏡,將目鏡測(cè)微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上,再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺(tái)測(cè)微尺刻度向上放在鏡臺(tái)上夾好,使測(cè)微尺分度位于視野中央。調(diào)焦至能看清鏡臺(tái)測(cè)微尺的分度。
3、小心移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺和轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測(cè)微尺(如目鏡測(cè)微尺分度模糊,可轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡上透鏡進(jìn)行調(diào)焦),使兩尺左邊的一直線重合,然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。
4、記錄兩條重合線間目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)。按下式計(jì)算目鏡測(cè)微尺每格等于多少μm:
鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)
目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)=————————— × 10
目鏡測(cè)微尺的格數(shù)
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1、目鏡校正:40倍顯微鏡目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)=17/70=0.24
2、細(xì)胞大小的測(cè)量:
五、作業(yè)與思考:
1、血細(xì)胞按含量高低,主要含有:紅細(xì)胞,白細(xì)胞,血小板。
白細(xì)胞最大,紅細(xì)胞次之,血小板最小。紅細(xì)胞:主要的功能是運(yùn)送氧。 白細(xì)胞:主要扮演了免疫的角色,當(dāng)病菌侵入人體時(shí),白細(xì)胞能穿過毛細(xì)血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍,吞噬。血小板:止血過程中起著重要作用。細(xì)胞形態(tài)見下圖。
2、植物細(xì)胞一般比動(dòng)物細(xì)胞大一些。形態(tài)圖見下。
3、在不同放大倍數(shù)下,測(cè)定的細(xì)胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍數(shù)越大,在視野中同等實(shí)際距離下的兩點(diǎn)視野距離更大,而更容易測(cè)量準(zhǔn)確。
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 3
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1.觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程,識(shí)別有絲分裂的不同時(shí)期。
2.初步掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技能。
3.初步掌握繪制生物圖的.方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
在植物體中,有絲分裂常見于根尖、莖尖等分生區(qū)細(xì)胞,高等植物細(xì)胞有絲分裂的過程,分為分裂間期和分裂期的前期、中期、后期、末期?梢杂酶弑讹@微鏡觀察植物細(xì)胞的有絲分裂的過程,根據(jù)各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的變化情況,識(shí)別該細(xì)胞處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期,細(xì)胞核內(nèi)的染色體容易被堿性染料著色。
三、材料用具
洋蔥根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、培養(yǎng)皿、鉛筆、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸、體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01g/ml的龍膽紫(或紫藥水)
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書P39)
1.洋蔥根尖的培養(yǎng)(提前3—4天)
2.解離:5min
3.漂洗:10min
4.染色:5min
5.制片
6.鏡檢
五、注意
1.解離充分是實(shí)驗(yàn)成功的必備條件。解離充分,組織才能分散,細(xì)胞也不會(huì)重疊。
2.漂洗時(shí)間一定要足夠,否則細(xì)胞染不上色。
3.染色時(shí),染液的濃度和染色時(shí)間必須掌握好。特別是染色不能過深,否則鏡下一片紫色,無法觀察。
六、討論
1.制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?談?wù)勀阕约旱捏w會(huì)。
2.在觀察清楚有絲分裂各個(gè)時(shí)期的細(xì)胞以后,繪出洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的簡(jiǎn)圖,并標(biāo)明時(shí)期。
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 4
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1. 初步學(xué)會(huì)觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的方法。
2. 理解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實(shí)驗(yàn)原理
當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞液中的水分就通過原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶液中,使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí),原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁逐漸分離開,也就是分升了質(zhì)壁分離當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的'濃度時(shí),外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進(jìn)入細(xì)胞液中,整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài),使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實(shí)驗(yàn)過程(見書P60)
物理實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ——化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ——生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ——實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式 ——實(shí)驗(yàn)報(bào)告模板
五、討論
1.如果將洋蔥表皮細(xì)胞浸潤(rùn)在與細(xì)胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象?
2.當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時(shí),紅細(xì)胞會(huì)不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象?為什么?
3.畫一個(gè)細(xì)胞在正常狀態(tài)下到經(jīng)過0.3g/ml蔗糖溶液處理,再經(jīng)過清水處理的細(xì)胞變化的一系列模式圖。
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 5
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2、觀察高等植物的葉綠體在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
二、實(shí)驗(yàn)原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的.光照條件下,葉綠體可以運(yùn)動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。在強(qiáng)光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。
活細(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運(yùn)動(dòng)做為標(biāo)志。
三、材料用具
蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆
四、實(shí)驗(yàn)過程
1、制作蘚類葉片的臨時(shí)裝片
2、用顯微鏡觀察葉綠體
3、制作黑藻葉片臨時(shí)裝片
4、用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
五、討論
1、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?
2、葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?
3、植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對(duì)于活細(xì)胞完成生命活動(dòng)有什么意義?
4、用鉛筆畫一個(gè)葉片細(xì)胞,標(biāo)出葉綠體的大致流動(dòng)方向。
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